紫外可見(jiàn)分光光度計是分析測試實(shí)驗室里常見(jiàn)的一種分析儀器，用于測定被測物質(zhì)在一定波長(cháng)照射下所產(chǎn)生的吸光度的大小，從而實(shí)現對物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。在平時(shí)的日常教學(xué)及到企業(yè)調研時(shí)，發(fā)現在分光光度計使用問(wèn)題上，使用者多多少少都存在一些疑惑或使用不規范的問(wèn)題，下面就常見(jiàn)的一些問(wèn)題進(jìn)行討論。

　　關(guān)于儀器的預熱問(wèn)題

　　在一般分光光度計的使用說(shuō)明書(shū)上，要求儀器預熱時(shí)間約20分鐘；若是帶微處理器的分光光度計，開(kāi)機后儀器自動(dòng)進(jìn)入自檢 (初始化 )狀態(tài)，約需1O分鐘左右。在分光光度計預熱這個(gè)環(huán)節上，很多使用者或多或少存在問(wèn)題，如開(kāi)機只預熱電路系統 (不調節波長(cháng)、打開(kāi)吸收池暗箱蓋預熱等)或認為初始化過(guò)程就是預熱等等。

　　對帶微處理器有自檢功能的分光光度計，開(kāi)機后儀器自檢 (初始化)結束后，在測定窗口上，設置所需波長(cháng)值，用一個(gè)吸收池裝上純凈水置于光路上，調 “0000A”后，預熱儀器，當儀器顯示讀數不再變化后即可進(jìn)行測定。

　　對于紫外可見(jiàn)分光光度計，由于有雙光源 (鎢燈與氘燈)， 為了延長(cháng)燈的使用壽命，開(kāi)機自檢完成后可以關(guān)掉測定時(shí)不用的光源燈。

　　2關(guān)于波長(cháng)準確度的檢查與校正

　　日常在使用分光光度計時(shí)，是否要經(jīng)常進(jìn)行儀器波長(cháng)準確度的檢查 ?答案是否定的。當在日常測定中發(fā)現儀器測定靈敏度下降，這時(shí)才應進(jìn)行波長(cháng)準確度的檢查，最簡(jiǎn)易的檢查方法 (粗檢 )是：儀器開(kāi)機后，調節波長(cháng)為 580nm，在吸收池座的通光道中插入一張白色卡片紙，若能觀(guān)察到一長(cháng)方形 的黃色光斑，說(shuō)明波長(cháng)準確度屬正常范圍，否則就應進(jìn)行波長(cháng)校正。

　　當儀器經(jīng)過(guò)長(cháng)途搬運、受過(guò)機械振動(dòng)或更換光源燈泡后，必須進(jìn)行波長(cháng)準確度的檢查與校正。粗檢同上，其校正方法有：干涉濾光片或鐠釹濾光片校正法、利用氘燈的特征發(fā)射線(xiàn)校正法。具體步驟可參考儀器使用說(shuō)明書(shū)。

　　3關(guān)于吸收池的使用問(wèn)題

　　按照吸收池使用的基本順序分說(shuō)如下：

　　(1)吸收池的潤洗

　　吸收池裝液前必須用待裝溶液潤洗 2～3遍，潤洗前是否要用純水先潤洗一遍呢?這可看具體情況區別對待。

　　如果初次用干的吸收池裝待測液 (特別是有色溶液)時(shí)，從維護保養吸收池的角度講，為減小其干玻面對顏色的吸附能力，便于用后吸收池的清洗，建議先用純水潤洗一遍，再用待裝溶液潤洗 2～3遍；若后再用此吸收池裝濃度相近或更高濃度的溶液 (如從小到大測定標準系列溶液的吸光度)時(shí)，可直接用待裝溶液潤洗2～3遍即可。

　　標準曲線(xiàn)法定量時(shí)，如果是先測定標準系列溶液的吸光度，當測到樣品溶液時(shí)，由于測定的樣品溶液濃度比最后一個(gè)標準溶液的濃度低或不可知時(shí)，建議先用純水潤洗一遍，再用待裝溶液潤洗 2～3遍。

　　(2)吸收池的裝液、擦拭與放置 吸收池潤洗完成后注入待測溶液至池高的 2/3~3/4處。

　　(3)吸收池成套性檢驗及處理 新吸收池或吸收池使用一段時(shí)間后都必須進(jìn)行成套性檢驗.